O museu mostra a evolução dos meios de transporte sobre duas rodas – são motocicletas, bicicletas motorizadas, scooters, bicicletas... No acervo, de cerca de 140 veículos de diversas parte do mundo, há desde uma réplica do celífero (bicicleta primitiva criada em 1791), a modelos clássicos da Harley-Davidson e motos de corrida.

Entre as pérolas nacionais está a motocicleta Amazonas que pertenceu à Policia Rodoviária Federal. Trata-se da primeira grande motocicleta feita no Brasil com base num motor Volkswagen.